A. Recoltarea
Pe cât posibil, probele recoltate trebuie trimise la laborator în aceeași zi, înainte de sfârșitul programului de lucru al acestuia. Trebuie evitată depozitarea peste noapte a probelor de urină sau țesuturi. Toate probele trebuie plasate în pungă cu gheață. Nu se dezinfectează cu alcool aria de unde urmează a se recolta.
B. Medii de transport
Colectarea probelor pe medii de transport adecvate este esențială pentru asigurarea viabilității microorganismelor ce urmează a fi cultivate.
Sisteme de transport
- Exsudate: Virocult, Chlamydia Transwab
- Țesuturi: Bulion de cultură furnizat de laboratorul de virusologie
Colectarea de probe pentru laboratorul de virusologie
Toate probele se trimit în gheață.
C. Proceduri disponibile
Izolare și identificare pentru Herpes Simplex, Cytomegalovirus, Varicella-Zoster, Virus Sincițial Respirator, Chlamydia Trachomatis; detectarea de antigen Rotavirus; status imun pentru Varicela-Zoster; status imun pentru Rubeola.
Nu se curăță cu alcool zona din care se vor preleva culturi.
D. Virusuri
Virusuri herpetice (CMV, HSV, VZV)
- Fluid din vezicule: Recoltarea cu un tampon steril virocult a fluidului obținut din veziculele sparte sau leziuni
- LCR: Recoltarea aseptică în recipiente sterile
- Țesut de la biopsie sau autopsie: Imersia țesutului în mediul de transport
- Leziuni ulcerative: Exsudate (anal, genital sau ocular). Se folosesc tampoane pentru exsudat tip virocult și se raclează suprafața leziunii.
- Urina: Recoltarea din urina de dimineață, proaspăt emisă, este de preferat. Se colectează urina din jetul mijlociu sau prin puncție suprapubiană, în recipient steril. Pentru CMV se vor face minim 2-3 recoltări, pentru creșterea șanselor de descoperire a CMV.
- Sânge:
- Serologie pentru rubeolă și varicelă: Cel puțin 2 mL sânge integral coagulat; nu este necesar să fie plasat în gheață.
- Culturi din sediment leucocitar: Cel puțin 1 mL recoltat în recipient heparinizat.
Virus sincițial respirator
Lavaj nazofaringian, aspirat traheal, sputa; exsudat faringian ca ultima alegere.
Virusul imunodeficienței umane (HIV)
- Sânge: serologie HIV – cel puțin 2 mL sânge integral, coagulat
- Culturi: Se ia legătura cu laboratorul de specialitate pentru instrucțiuni asupra metodelor de cultivare a HIV din sânge. Se obține consimțământul înainte de trimiterea probelor la laborator.
E. Chlamydia trachomatis
Pentru rezultate optime se recoltează aseptic, prin raclaj sau tamponament viguros pentru a asigura un număr adecvat de celule epiteliale în mediul de recoltare.
-
Tampon de exsudat: Tampon steril pentru transport, Chlamydia Transwab
- Conjunctivă: Atingeți ferm cu tamponul de exsudat pleoapa inferioară întoarsă; se plasează în mediu de cultură și se transportă în gheață.
-
Lavajul nazo-faringian: (Transwab - acceptabil)
- Se aspiră aproximativ 1-3 mL de ser-fosfat într-o pară de cauciuc (sau ser fiziologic fără conservant).
- Se injectează cu grijă fluidul în nări
- Se aspiră fluidul din nări în para de cauciuc. Se transferă conținutul în eprubeta sterilă.
-
Urina: Nu este potrivită pentru culturi de Chlamydia.
F. Detectarea antigenelor de rotavirus
Proba de materii fecale în mediu lichid. Nu se acceptă tampon de exsudat.
G. Transportul probelor
Transportul probelor: În pungă cu gheață, către laboratorul de virusologie, în timpul programului de lucru.
Depozitarea probelor după programul de lucru: labilitatea organismului viral în afara celulelor vii necesită că toate probele să fie transportate la laborator cât mai rapid posibil, în gheață. Dacă se recoltează după orele de lucru ale laboratorului, probele trebuie păstrate la frigider, la 4°C, nu mai mult de 48 de ore. Altminteri, proba trebuie păstrată congelată, la –70°C. Excepție fac probele de urină și țesuturi care nu ar trebui congelate, ci, în mod ideal, ar trebui cultivate chiar în ziua recoltării.
Tabel 22 – Diagnosticul infecțiilor
| Micro-organism | Leziuni | Proba recoltată | Mod de transport |
|---|---|---|---|
| HSV - I, II | Buze + cavitate bucală: gingivostomatită, herpes recurent labial | Lichid din vezicule sau exsudat; exsudat faringian | Virocult |
| Ochi: Conjunctivită foliculară acută, Ulcerații corneene, Cheratită | Lichid din vezicule sau exsudat | Virocult | |
| SNC: encefalită | Biopsie cerebrală*; LCR; HSV PCR, Exsudat faringian | Mediu de transport pentru țesuturi; Virocult | |
| Meningită aseptică | Testul QBT | Recipient heparinizat | |
| Tegumente: vezicule | Lichid vezical* sau exsudat | ||
| Infecții generalizate: Nou-născut | Urină*; QBT*; biopsie; lichid vezical*; spută*; lavaj bronșic; coprocultură*; secreție conjunctivală | Recipient heparinizat, Virocult | |
| VZV | Varicelă | Lichid vezicular | Virocult |
| Zoster | Lichid vezicular sau LCR | Virocult | |
| Infecții generalizate: Nou-născut (gravidă cu varicelă) | Ser | Recipient neheparinizat | |
| Exsudat faringian, secreție sau lichid vezicular*, LCR*, urină, lavaj bronșic | Virocult | ||
| CMV | Infecții generalizate: Nou-născut | Urină*, QBC (buffy coat); Saliva, LCR | Recipient heparinizat, Virocult |
| Infecții SNC | LCR, urină* | ||
| Altele: hepatită, pneumonie, mononucleoza | Urină*, buffy coat; Biopsie | Recipient heparinizat, Recipient de transport pentru țesuturi | |
| Chlamydia Trachomatis | Ochi: conjunctivită la nou-născut și adult | Exsudat* | Mediu de transport pentru Chlamydia |
| Respirator: pneumonie la nou-născut | Exsudat nazal* | Mediu de transport pentru Chlamydia | |
| Pneumonie la adult | Exsudat nazofaringian |
*Probele de laborator recomandate pentru o creștere optimă în culturi.